O uso descontrolado de antibiótico tem tornado os micro-organismos mais resistentes a esses fármacos, a partir disso as plantas se tornaram um meio viável para o combate desses micro-organismos. A Asdiosperma pyrifolium Mart. (Pereiro) é uma planta da Caatinga, popularmente indicada para o tratamento de infecções microbianas. Objetivou-se avaliar a atividade antimicrobiana do extrato hidroalcoólico de folha da A. pyrifolium frente às cepas padronizadas bacterianas e fúngicas, através de análise comparativa entre os métodos de difusão em disco e cavidade em placa. O extrato hidroalcoólico das folhas foi obtido por processo de percolação a frio, com álcool a 70º GL, e submetido a rotaevaporação. A avaliação do potencial antimicrobiano do extrato foi realizada pelos métodos de difusão em disco e cavidade em placa, sendo cada ensaio realizado em triplicata. Para o ensaio antimicrobiana, o extrato foi testado frente a cepas padronizadas de bactérias (Pseudomonas, aeruginosa, Salmonella thyphimurium, Proteus vulgaria, Serratia marcescens, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae) e fungos (Candida tropicalis, e C. albicans). Constatou-se efeito antimicrobiano, em ambos os métodos, do extrato à 100% de sua concentração, frente as cepas Salmonella. sp., Proteus vulgaris, S. marcescens, P. aeruginosa, K. pneumoniae. Os halos variaram de 10,0 a 13,0 mm, sendo o método em cavidade em placa mais efetivo em relação ao de disco. Portanto, A pyrifolium apresenta perspectiva para a obtenção de antibióticos naturais, recomendando-se estudos mais detalhados.