Nas últimas duas décadas do século XX, o mundo vem sentindo necessidade de mais produtos naturais que possam ser utilizados tanto na alimentação, quanto em produtos cosméticos, perfumaria, mas principalmente para uso medicinal. Com isso, o objetivo deste trabalho foi realizar ensaios de citoxicidade com o OE foliar de Croton heliotropiifolius sobre o modelo do microcrustáceo Artemia salina Leach para determinar a concentração letal para 50% dos indivíduos (LC50 µg/mL). Para isso, foi extraído óleos essencial de folhas de Croton heliotropiifolius, coletados no Parque Nacional Vale do Catimbau, Buíque-PE, por hidrodestilação durante 3 horas e em seguida testados em Artemia salina quanto a sua toxicidade com diluições seriadas (1000, 500, 250, 125, 62,5 e 31,25 µg/mL) de soluções de água do mar com Tween 80. Sendo medida a concentração letal para 50% de mortalidade após 24 h de exposição às diferentes soluções. LC50 crônico e intervalos de confiança de 95% foram determinados usando o método probit 10, como medida de toxicidade do óleo. C. heliotropiifolius apresentou LC50 de 62,3 µg/mL, caracterizando-se como um óleo de alta toxicidade.