A inseminação artificial com sêmen congelado em asininos ainda caminha a passos curtos, sofrendo interferência de vários fatores, por esse motivo, uma forma que vem sendo amplamente difundida entre os produtores de equídeos é o uso de sêmen refrigerado. Desta forma, o presente trabalho objetivou avaliar a influência de três diferentes meios diluentes usados para equinos, dois comerciais e um produzido seguindo recomendações do meio Kenney, sobre o sêmen asinino refrigerado por fonte de frio passiva, disposto em containers descartáveis para avaliação de motilidade e vigor a cada 12 horas, até completar o período de 72 horas. Na avaliação em conjunto da motilidade e vigor espermático é possível notar uma boa manutenção dessas características espermáticas, necessárias para a fecundação, ate às 24 horas, com uma pequena redução até as 36, para todos os grupos, mantendo até esse momento padrões aceitáveis para utilização “in vivo”.