RESUMO: A aspiração endotraqueal é um procedimento frequente no âmbito hospitalar e tem como objetivo remover secreções, promover a permeabilidade das vias aéreas e otimizar a ventilação pulmonar, no entanto, trata-se de um evento invasivo que necessita de treinamento por parte de toda a equipe multidisciplinar. O objetivo do presente estudo foi investigar o conhecimento dos profissionais de saúde do Hospital Regional Dr. Mariano Coelho/RN, sobre o procedimento de aspiração endotraqueal. A amostra foi composta de forma não probabilística e incluídos 24 profissionais de diversas áreas da saúde que responderam um questionário estruturado de múltipla escolha contendo perguntas sobre o procedimento da aspiração endotraqueal. As variáveis foram avaliadas por meio de análise descritiva, em média e desvio-padrão e em frequências absolutas e relativas. Os principais resultados apontaram que a amostra foi composta por 66,6% de mulheres, e com idade média de 35,7 ± 11,3 anos, sendo a maioria 58, 3% (n=14) da área de enfermagem (enfermeiros e técnicos em enfermagem). Os itens respondidos erroneamente foram em relação à indicação do procedimento (66,7%), ao tempo de introdução da sonda traqueal na via aera (62,5%) e utilização de solução salina para fluidificação da secreção (79,1%). Conclui-se que os profissionais de saúde do referido hospital apresentam lacunas pontuais sobre o procedimento da aspiração e que estas são facilmente revertidas com o processo de educação continuada, proposto como estratégia para debelar as discordâncias.