Artigo Anais III JOIN / Edição Brasil

ANAIS de Evento

ISSN: 2594-8318

ATIVIDADES DE ENZIMAS ANTIOXIDATIVAS (SUPERÓXIDO DISMUTASE E CATALASE) NO TECIDO PANCREÁTICO DE RATOS WISTAR, SUPLEMENTADOS COM MELATONINA.

Palavra-chaves: ENZIMAS, PÂNCREAS, MELATONINA Pôster (PO) CIÊNCIAS BIOLÓGICAS
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      A Melatonina é um hormônio, que é secretado e liberado pelas células endócrinas da glândula pineal que possui várias características como Anti-inflamatória, Antioxidante, Cronobiológica, regulação dos ritmos circadianos. E esse trabalho visa pesquisar os efeitos da Melatonina no Pâncreas, à partir de duas análises enzimáticas, Superóxido Dismutase e Catalase. \r\n
      Nesse período, no Laboratório de Bioquímica e Expressão Gênica (LABIEX), foi realizada desde a reprodução os seguintes procedimentos: Cuidado com ratos, Gavagem, sacrifício de ratos e por fim análise das atividades enzimáticas.\r\n
                    Esse trabalho foi aprovado pelo COMITÊ DE ÉTICA PARA USO DE ANIMAIS/UECE, (CEUA) nº2214971/2017. Foram utilizados 12 ratos da linhagem Wistar, onde os mesmos ficavam no biotério do Instituto Superior de Ciências Biomédicas da Universidade Estadual do Ceará (UECE). Os animais foram mantidos em caixas de plástico, em condições ideais, em ciclo claro/escuro (12h/12h), e com ração e água apd libitum sendo colocados de 3 em 3 dias. O estudo está sendo composto por 2 grupos experimentais, Controle (C) (n=6) e o Suplementado com Melatonina (SMLT) (n=6).\r\n
                   Atingindo os pesos de 250 à 300g, os ratos do grupo (C) passaram pelo processo de Gavagem, que foram 14 dias sendo feita a ingestão somente de 3µL de salina. Já o grupo (SMLT), vai ser feita a ingestão de 5mg/kg de Melatonina que vai ser diluída em 3mL de salina. O processo de Gavagem é feito através de uma seringa com uma cânula específica para introduzir a dosagem, sem prejudicar o tecido do animal. Após os 14 dias de Gavagem, é feito o sacrifício dos animais. Onde logo foi feita a dissecação do tecido estudado (Pâncreas), posteriormente sendo armazenados em nitrogênio líquido e a -80 ⁰C em um freezer. O processo de sacrifício é feito através do método físico (Guilhotinamento), e esse método é justificado devido o método anestésico promover alterações químicas que iriam interferir nos resultados das atividades enzimáticas (Catalase e Superóxido Dismutase). A atividade da enzima CAT foi mensurada em resposta a quantidade de peróxido de hidrogênio pelo método de AEBI (1984) e os valores da CAT foram corrigidos pelo valor da proteína de cada amostra (U catalase/mg proteína. Já para atividade enzimática da SOD será, assim como a CAT, homogeneizada em tampão fosfato de potássio (KPE) em aproximadamente 10,20 e 40 µL de amostra. Os reagentes usados são o Tampão Glicina (970µL para o Branco, sendo o único que vai variar de acordo com a quantidade de amostra do tecido), Catalase (10µL) e a Adrenalina (20µL), onde Catalase e Adrenalina não mudam. Vale a pena ressaltar e deixar claro que todos os animais não foram pinealectomizados, ou seja, sua produção de MLT endógena não foi comprometida.\r\n
                  Portanto, pode-se concluir que de acordo com os resultados das análises enzimáticas dos grupos, poderemos saber o verdadeiro papel ou pelo menos termos uma noção, do hormônio Melatonina nas células β pancreáticas.
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      A Melatonina é um hormônio, que é secretado e liberado pelas células endócrinas da glândula pineal que possui várias características como Anti-inflamatória, Antioxidante, Cronobiológica, regulação dos ritmos circadianos. E esse trabalho visa pesquisar os efeitos da Melatonina no Pâncreas, à partir de duas análises enzimáticas, Superóxido Dismutase e Catalase. \r\n
      Nesse período, no Laboratório de Bioquímica e Expressão Gênica (LABIEX), foi realizada desde a reprodução os seguintes procedimentos: Cuidado com ratos, Gavagem, sacrifício de ratos e por fim análise das atividades enzimáticas.\r\n
                    Esse trabalho foi aprovado pelo COMITÊ DE ÉTICA PARA USO DE ANIMAIS/UECE, (CEUA) nº2214971/2017. Foram utilizados 12 ratos da linhagem Wistar, onde os mesmos ficavam no biotério do Instituto Superior de Ciências Biomédicas da Universidade Estadual do Ceará (UECE). Os animais foram mantidos em caixas de plástico, em condições ideais, em ciclo claro/escuro (12h/12h), e com ração e água apd libitum sendo colocados de 3 em 3 dias. O estudo está sendo composto por 2 grupos experimentais, Controle (C) (n=6) e o Suplementado com Melatonina (SMLT) (n=6).\r\n
                   Atingindo os pesos de 250 à 300g, os ratos do grupo (C) passaram pelo processo de Gavagem, que foram 14 dias sendo feita a ingestão somente de 3µL de salina. Já o grupo (SMLT), vai ser feita a ingestão de 5mg/kg de Melatonina que vai ser diluída em 3mL de salina. O processo de Gavagem é feito através de uma seringa com uma cânula específica para introduzir a dosagem, sem prejudicar o tecido do animal. Após os 14 dias de Gavagem, é feito o sacrifício dos animais. Onde logo foi feita a dissecação do tecido estudado (Pâncreas), posteriormente sendo armazenados em nitrogênio líquido e a -80 ⁰C em um freezer. O processo de sacrifício é feito através do método físico (Guilhotinamento), e esse método é justificado devido o método anestésico promover alterações químicas que iriam interferir nos resultados das atividades enzimáticas (Catalase e Superóxido Dismutase). A atividade da enzima CAT foi mensurada em resposta a quantidade de peróxido de hidrogênio pelo método de AEBI (1984) e os valores da CAT foram corrigidos pelo valor da proteína de cada amostra (U catalase/mg proteína. Já para atividade enzimática da SOD será, assim como a CAT, homogeneizada em tampão fosfato de potássio (KPE) em aproximadamente 10,20 e 40 µL de amostra. Os reagentes usados são o Tampão Glicina (970µL para o Branco, sendo o único que vai variar de acordo com a quantidade de amostra do tecido), Catalase (10µL) e a Adrenalina (20µL), onde Catalase e Adrenalina não mudam. Vale a pena ressaltar e deixar claro que todos os animais não foram pinealectomizados, ou seja, sua produção de MLT endógena não foi comprometida.\r\n
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Publicado em 12 de outubro de 2017

Resumo

A Melatonina é um hormônio, que é secretado e liberado pelas células endócrinas da glândula pineal que possui várias características como Anti-inflamatória, Antioxidante, Cronobiológica, regulação dos ritmos circadianos. E esse trabalho visa pesquisar os efeitos da Melatonina no Pâncreas, à partir de duas análises enzimáticas, Superóxido Dismutase e Catalase. Nesse período, no Laboratório de Bioquímica e Expressão Gênica (LABIEX), foi realizada desde a reprodução os seguintes procedimentos: Cuidado com ratos, Gavagem, sacrifício de ratos e por fim análise das atividades enzimáticas. Esse trabalho foi aprovado pelo COMITÊ DE ÉTICA PARA USO DE ANIMAIS/UECE, (CEUA) nº2214971/2017. Foram utilizados 12 ratos da linhagem Wistar, onde os mesmos ficavam no biotério do Instituto Superior de Ciências Biomédicas da Universidade Estadual do Ceará (UECE). Os animais foram mantidos em caixas de plástico, em condições ideais, em ciclo claro/escuro (12h/12h), e com ração e água apd libitum sendo colocados de 3 em 3 dias. O estudo está sendo composto por 2 grupos experimentais, Controle (C) (n=6) e o Suplementado com Melatonina (SMLT) (n=6). Atingindo os pesos de 250 à 300g, os ratos do grupo (C) passaram pelo processo de Gavagem, que foram 14 dias sendo feita a ingestão somente de 3µL de salina. Já o grupo (SMLT), vai ser feita a ingestão de 5mg/kg de Melatonina que vai ser diluída em 3mL de salina. O processo de Gavagem é feito através de uma seringa com uma cânula específica para introduzir a dosagem, sem prejudicar o tecido do animal. Após os 14 dias de Gavagem, é feito o sacrifício dos animais. Onde logo foi feita a dissecação do tecido estudado (Pâncreas), posteriormente sendo armazenados em nitrogênio líquido e a -80 ⁰C em um freezer. O processo de sacrifício é feito através do método físico (Guilhotinamento), e esse método é justificado devido o método anestésico promover alterações químicas que iriam interferir nos resultados das atividades enzimáticas (Catalase e Superóxido Dismutase). A atividade da enzima CAT foi mensurada em resposta a quantidade de peróxido de hidrogênio pelo método de AEBI (1984) e os valores da CAT foram corrigidos pelo valor da proteína de cada amostra (U catalase/mg proteína. Já para atividade enzimática da SOD será, assim como a CAT, homogeneizada em tampão fosfato de potássio (KPE) em aproximadamente 10,20 e 40 µL de amostra. Os reagentes usados são o Tampão Glicina (970µL para o Branco, sendo o único que vai variar de acordo com a quantidade de amostra do tecido), Catalase (10µL) e a Adrenalina (20µL), onde Catalase e Adrenalina não mudam. Vale a pena ressaltar e deixar claro que todos os animais não foram pinealectomizados, ou seja, sua produção de MLT endógena não foi comprometida. Portanto, pode-se concluir que de acordo com os resultados das análises enzimáticas dos grupos, poderemos saber o verdadeiro papel ou pelo menos termos uma noção, do hormônio Melatonina nas células β pancreáticas.

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