Os tensoativos são substâncias que possuem como principal característica a capacidade de atenuar as tensões superficiais existentes entre interfaces fluidas. Na indústria petroleira são amplamente utilizados nos processos de recuperação avançada de petróleo. A rota de obtenção de tais compostos por via biotecnológica tem se mostrado uma alternativa bastante viável tendo em vista que os produtos gerados são menos agressivos ao meio ambiente e possuem boa estabilidade termodinâmica. O presente trabalho avaliou o crescimento das leveduras Candida guilliermondii e Debaryomyces hansenii objetivando a aplicação das mesmas como produtoras de substâncias superficialmente ativas, apresentando como respostas as seguintes velocidades específicas de crescimento, respectivamente: 0,119 h-1 e 0,0508 h-1. Os melhores resultados de emulsificação foram para o óleo de motor, sendo os mesmo de 78,75% para a Candida e 76,46% para a Debaryomyces.