Corpos d'água doce neotropicais são reconhecidos por abrigarem grande diversidade ictiológica. O Rio Tietê, um dos mais importantes rios de São Paulo, apesar de parcialmente degradado, tem cabeceiras preservadas e de valor ecológico, com registros de espécies ameaçadas. O rio está inserido na Bacia Hidrográfica do Rio Tietê, dividida em Alto, Médio e Baixo Tietê. Este trabalho mapeou a distribuição de duas espécies coletadas no Alto Tietê e correlacionou suas ocorrências com o uso e ocupação do solo. A distribuição espacial da ictiofauna foi avaliada em 51 pontos de amostragem. O mapeamento foi realizado no QGIS 3.34.8, delimitando a bacia e inserindo as coordenadas dos pontos para identificar a presença ou ausência das espécies. Um buffer de 300 metros foi criado em torno dos pontos, usando dados do MapBiomas v9.0, para analisar o uso do solo e extrair as porcentagens de cada fisionomia. Dos 51 pontos, 12 apresentaram Osteogaster aenea, 1 Hoplisoma nattereri, e 1 ambos. Foi realizado o teste de Shapiro-Wilk para verificar a normalidade das variáveis. A correlação entre fisionomia e presença das espécies foi analisada usando a Correlação de Spearman e os Testes de Mann-Whitney/Wilcoxon, separadamente para cada espécie. Os resultados mostraram que a maioria das variáveis de fisionomia não segue uma distribuição normal, exceto o "Mosaico de Usos". As correlações de Spearman indicaram que O. aenea tem uma correlação negativa moderada com silvicultura e positiva com áreas não vegetadas, sugerindo influência dessas variáveis. Para H. nattereri, a única correlação moderada foi com outras lavouras temporárias. Nos testes de Mann-Whitney, apenas a silvicultura mostrou uma diferença significativa em relação à presença de O. aenea, reforçando a ideia de que essa variável afeta a espécie. Para H. nattereri, nenhuma variável apresentou diferença significativa. Assim, o impacto das variáveis parece mais relevante para O. aenea do que H. nattereri.
