Baryancistrus xanthellus, uma espécie endêmica do rio Xingu, é valorizada no mercado global de peixes ornamentais devido ao seu padrão de coloração distinto. Suas populações estão ameaçadas pela superexploração e pelas mudanças ambientais, especialmente as causadas pela Usina Hidrelétrica de Belo Monte. Embora ainda não existam registros de reprodução artificial, o domínio da reprodução ex situ é crucial, considerando sua relevância econômica e ecológica, além dos esforços para a conservação da espécie. Neste contexto, o estudo dos gametas é essencial para o desenvolvimento de biotecnologias reprodutivas. Este estudo teve como objetivo analisar as características espermáticas de Baryancistrus xanthellus coletados na natureza, visando contribuir para estratégias de conservação ex situ e o avanço de tecnologias de reprodução assistida. Dez machos maduros foram coletados durante a temporada reprodutiva (outubro-fevereiro de 2022), com autorização do SISBIO (Nº 47941-5). Com anuência do CEUA (Protocolo 274188368-80/UFPA) as amostras seminais foram obtidas sem indução hormonal e diluídas em solução imobilizadora. A ativação espermática foi feita com diluição 1:1 em água destilada, e a motilidade foi analisada pelo sistema CASA, com vídeos capturados por microscópio. A duração média da motilidade foi de 424,80 ± 278,40 segundos, com queda significativa após 180 segundos. Foram observadas correlações negativas entre anomalias espermáticas e motilidade (P = 0,0001). Os machos liberaram em média 75,00 ± 60,09 µL de sêmen, com uma concentração de 1,10 ± 0,93 × 10? espermatozoides/mL. Este estudo demonstrou a viabilidade de coletar sêmen de Baryancistrus xanthellus selvagem sem tratamento hormonal, constituindo um avanço para a conservação da espécie, com potencial para futuras iniciativas de conservação de germoplasma e fertilização in vitro.