A urocultura é um dos exames laboratoriais mais sujeitos a interferências pré-analíticas e analíticas, devido às condições de coleta, transporte e manipulação da amostra. O objetivo deste estudo foi validar um sistema de transporte para o setor de Microbiologia. Foi desenvolvida uma pesquisa transversal, de caráter quantitativo, na cidade de Campina Grande-PB. A análise da urocultura foi realizada em duplicata: uma amostra padrão e uma amostra após transporte. Foram analisadas 97 amostras; em 65% (n=63) não houve crescimento bacteriano. Nos casos positivos, a prevalência foi de Escherichia coli (59%). A regressão linear mostrou um coeficiente de correlação insatisfatório. O teste t de Student indicou que houve diferenças no resultado final das uroculturas. O armazenamento e o transporte realizado nas condições avaliadas não foram satisfatórios, pois afetaram diretamente o resultado das análises, gerando um preocupante número de uroculturas positivas. É necessário um maior treinamento da equipe do laboratório para minimizar esta interferência causada pelo armazenamento e transporte inadequados.